Caracterización molecular de cepas de streptococcus pyogenes aisladas de cuadros invasores basada en el polimorfismo del regulón vir / Molecular characterization of streptococcus pyogenes from invasive infections based on vir-regulon polymorphism

A pesar del aumento de infecciones invasoras por Streptococcus pyogenes: fasceitis necrozante (FN) y síndrome de shock tóxico (SST) en nuestro medio, su caracterización generalmente se limita a identificación de especie y prácticamente no existen estudios moleculares. La literatura describe diversos métodos para tipificar S pyogenes (MLEE, PFGE y secuenciación de emm) que resultan complejos. Una alternativa es la técnica basada en el polimorfismo del regulón vir (emm, emm I, scp A, vir R) que es más sencilla y permite correlacionar los virRLFP con los serotipos M. Objetivo: caracterizar S. pyogenes aislados de cuadros invasores mediante vir-RFLP para establecer relaciones entre cepas locales y extranjeras. Materiales y Métodos: se estudiaron 30 cepas de S. pyogenes aisladas de pacientes con cuadros invasores (SST/FN: 8; infecciones de piel y tejidos blandos: 13; infecciones de cavidades estériles: 9) mediante Long PCR-RFLP (amplificación regulón vir con partidores VUF y SBR, seguido de digestión con HaeIII). Resultados: 28/30 (93 por ciento) cepas presentaron regulones entre 4,2 - 7,8 Kb y dos entre 1,5 -1,6 Kb. Se establecieron 14 patrones vir-RFLP y 3 grupos génicos. Dos grupos génicos presentaron patrones similares a los descrito para los serotipos M y se asociaron a una determinada evolución clínica: grupo I, similar a M1 y asociado a infecciones de cavidades estériles; grupo III, similar a M3 y asociado a SST/FN. El grupo II fue heterogéneo en relación a los serotipos, pero concentró las cepas aisladas de infecciones de piel y tejidos blandos. Conclusiones: Las cepas de S. pyogenes aisladas de cuadros severos presentan gran diversidad génica. Sin embargo, tienden a agruparse según serotipos y a asociarse a una determinada evolución clínica destacándose la asociación entre vir-RFLP, tipo serotipo M3 y SST/FN. Las dos cepas con amplicones pequeños constituyen un hallazgo interesante, que requiere mayor investigación

Detección de los genes de las exotoxinas pirogénicas SpeA, SpeB y SpeC en cepas chilenas de streptococcus pyogenes y su asociación con la clínica / Detection of pyrogenic exotoxin SpeA, SpeB and SpeC genes in chilean streptococci isolates and their association with clinical manifestations

Background: The virulence of Streptococcus pyogenes is determined by a variety of structural molecules, toxins and complex enzymes. Pyrogenic exotoxins cause fever, erythematous reactions, cytotoxic and immunological effects. Aim: To assess the frequency of speA, speB and speC genes in Chilean Streptococcus pyogenes strains and their association with the invasiveness of infections. Material and methods: The genes for pyrogenic exotoxins SpeA, SpeB and SpeC were determined by polymerase chain reactions in 114 strains of group A Streptococcus pyogenes isolated from Chilean patients with invasive or non invasive infections. Results: The gene for SpeA was present in 30.7 percent of isolates, the gene for SpeB was present in 69.3 percent and the gen for SpeC in 44.7 percent of isolates. The gene for SpeA was present in 20 of 33 invasive infections and in 15 of 81 non invasive infections (p <0.0001). On the contrary, the gene for SpeC was present in 11 of 33 invasive infections and in 41 of 81 non invasive infections (p <0.05). The frequency of speB was similar in invasive and non invasive infections. Conclusions: There is a clear relationship between the presence of SpeA genes and the severity of infections caused by Streptococcus pyogenes

Vigilancia de susceptibilidad de cocáceas grampositivas a betalactámicos, glicopéptidos y otros antimicrobianos / Surveillance of gram positive cocci susceptibility to betalactamics, glycopeptides and other antimicrobials

Background: During the last decade, there has been a progressive increase in the resistance of gram (+) cocci to betalactamics and other antimicrobials. Therefore, vancomycin and teicoplanin have incorporated as alternative antimicrobial drugs. Aim: To assess the susceptibility of gram (+) cocci to different antimicrobials including vancomycin and teicoplanin. Material and methods: We studied 447 strains of gram (+) cocci coming from ambulatory and hospitalized patients. These included 308 enterococcus sp strains, 99 staphycoccus aureus strains and 40 coagulase negative staphylococci strains. Enterococci susceptibility was measured using minimal inhibitory concentrations in agar and that of staphylococci, through diffusion. Susceptibility to vancomycin and teicoplanin was measured using minimal inhibitory concentrations in all strains. Results: Enterococcus faecalis was 100 percent susceptible to ampicillin, penicillin, vancomycin and teicoplanin, 23 percent susceptible to tetracyclin and 47 percent to chloramphenicol. Susceptibility of E faecium was 61 percent to penicillin, 49 percent to chloramphenicol, 41 percent to tetracyclin, 100 percent to vancomycin and teicoplanin. Of 19 enterococcus spp strains, 90 percent were susceptible to ampicillin, 80 percent to penicillin, 55 percent to chloramphenicol and 45 percent to tetracyclin. Only one E casseiflavus strain had a low level resistance to vancomycin and was susceptible to teicoplanin. No staphylococcus aureus strain was resistant to vancomycin or teicoplanin. Conclusions: A permanent surveillance of gram (+) cocci antimicrobial susceptibility is required to update therapeutic schemes

Comparación de la reacción de polimerasa en cadena y cultivo en la detección de ureaplasma urealyticum en líquido amniótico / Comparison of polimerase chain reaction and culture in the detection of ureaplasma urealyticum in amniotic fluid

Se ha demostrado una importante asociación entre U. urealyticum y enfermedades materno-infantiles tales como rotura prematura de membranas, parto prematuro y enfermedad respiratoria en niños de muy bajo peso. Debido a que el cultivo de este microorganismo es un procedimiento costoso que requiere de hasta 5 días para descartar una muestra como negativa, se evaluó la sensibilidad y especificidad de la RPC para detectar U. urealyticum en líquido anmiótico. Los resultados indican que la RPC posee alta especificidad (100 por ciento) y sensibilidad (95,8 por ciento). Aunque se requiere de mayor evaluación clínica, este método rápido de detección de la bacteria (menos de 24 horas) es de particular importancia en el manejo y prevención de la morbimortalidad en recién nacidos y embarazadas

Consumo de antimicrobianos y variación de resistencia de bacilos Gram negativos en un período de diez años: Hospital San Juan de Dios, Chile / Consumption of antimicrobials and variation of Gram negative bacilli resistance in a 10 years period: Hospital San Juan de Dios, Chile

El problema de la resistencia bacteriana a antimicrobianos presenta una elevada prevalencia, con serias implicancias desde el nivel de salud pública hasta los resultados de la terapia individual. Los objetivos del trabajo fueron estudiar niveles de resistencia y su relación con el consumo de antimicrobianos de uso libre (ampicilina, gentamicina) y restringido (amikacina, cefazolina, cefotaxima) en bacilos gram negativos (E. Coli, K. pneumoniae, proteus sp., P. aeruginosa, A. baumannii) en el período de 1987 a 1997 en el Hospital San Juan de Dios. E. coli incrementó su resistencia a ampicilina y cefazolina, relacionado a un aumento en su consumo. Presentó baja resistencia a aminoglicósidos y antibioticos de uso restringido y poca variación de ésta a pesar de variar su consumo. La resistencia de K. pneumoniae a gentamicina disminuyó significativamente la última década, asociada a disminución en su consumo. Para cefotaxima y amikacina hubo relación entre resistencia y consumo de antimicrobianos. La resistencia de proteus sp disminuyó para antibióticos de uso libre como ampicilina, y gentamicina, esta última en clara relación con el consumo. P. aeruginosa mostró baja resistencia a amikacina y alta a gentamicina, mientras que A. baumannii presentó alta resistencia a ambas. La existencia de factores no considerados en el estudio, tales como la velocidad variable de adquisición de resistencia, características de cada paciente, medidas epidemiológicas implementadas y ocurrencia de epidemias, nos impide descartar la existencia de una fuerte relación causal entre consumo y resistencia. Tal relación es avalada en diversos estudios mediante una asociación consistente, una variación concurrente, un patrón dosis - respuesta y la presencia de un modelo biológico que explica el fenómeno. Junto a las medidas de control de infecciones, la clave para combatir la resistencia bacteriana es el uso prudente de antimicrobianos. La monitorización del consumo de antibióticos en el nivel hospitalario (mediante el DDD) y de las variaciones en la resistencia a éstos, permite implementar estrategias eficientes de manejo del problema

Microscopía electrónica en acinetobacter baumannii biotipos 9 y 8 aislados de infecciones intrahospitalarias en Chile / Electronic microscopy on acinetobacter baumannii biotypes 9 and 8 isolated from nosocomial infections in Chile

Acinetobacter baumannii ha emergido en los últimos años como una etiología importante de infecciones intrahospitalarias (IIH). De los 19 biotipos que conforman la especie, los biotipos 9 y 8 constituyen aproximadamente el 90 por ciento de las cepas aisladas en nuestro país, desconociéndose los factores que favorecen su mayor prevalencia. En el presente estudio hemos investigado mediante microscopía electrónica, la presencia de cápsula en dos cepas de A. baumannii, biotipos 9 y 8 aislados de IIH durante 1995 en el Hospital San Juan de Dios. Cultivos por la noche en agar sangre fueron teñidos con azul de Alsacia y tratados con antisueros específicos. Se estudió igualmente las características de hidrofobicidad de las bacterias y la presencia de cápsula al microscopio de luz. Se observó al microscopio electrónico una capa densa de material capsular en ambas cepas. Las cepas se caracterizaron asimismo por ser hidrofílicas y presentar un halo compatible con una cápsula al microscopio de luz. Es probable que la cápsula otorgue a estos microorganismos una superficie hidrofílica y contribuya a su mayor virulencia y prevalencia en los hospitales chilenos

Adherencia de acinetobacter baumannii al tejido de tráquea de la rata / Adherence of acinetobacter baumannii to rat trachial tissue

Background: Acinetobacter baumannii is an important nosocomial pathogen whose virulence factors have not been fully elucidated. Aim: To study the adherence and hemagglutinating capacity of several biotypes of Acinetobacter baumannii. Material and methods: Thirty nine strains of Acinetobacter baumannii isolated from hospitalized patients were studied. The adherence of these strains to small pieces of rat tracheal tissue was studied. Additionally, their ability to hemagglutinate human erythrocytes and the effect of D-mannose and D-galactose on the adherence and hemagglutinating capacity was assessed. Transmission electron microscopy of strains was performed looking for the presence of fimbriae. Results: All strains exhibited adherence to tissues. All strains had also D-mannose and D-galactose resistant hemagglutinating ability. Fimbriae were found in Acinetobacter baumannii and E coil cells. Conclusions: Adherence of Acinetobacter baumannii to rat tracheal tissue, apparently not related to the presence of fimbriae, may be a virulence mechanism of this bacterium

Listeria monocytogenes: aspectos clínicos y microbiológicos / Listeria monocytogenes: clinical and microbiological aspects

L. monocytogenes es considerada uno de los patógenos alimentarios más virulentos, por su alta tasa de mortalidad, que alcanza un 26 a 31 por ciento en las distintas series. La mayor incidencia se concentra en dos grupos: neonatos y adulto mayor. Las características fisiológicas que posee L. monocytogenes la convierten en un microorganismo con alta capacidad para contaminar productos alimenticios, los que a su vez pueden constituir una fuente de contaminación cruzada a otros alimentos. Su patogenicidad se basa fundamentalmente en la invasión celular, gracias a la expresión de listeriolisina O, y a su capacidad de evadir la respuesta inmune. Las manifestaciones clínicas son variadas, existiendo el estado de portación, infección asintomática, síndrome diarreico agudo, y formas invasoras graves como septicemia y meningitis. El diagnóstico microbiológico de este agente a partir de cuadros clínicos se realiza mediante aislamiento en muestras exentas de flora microbiana residente, que son sembradas en medios enriquecidos rutinarios (agar sangre, chocolate, etc) y no presenta mayor dificultad de estudio. En cambio, el aislamiento a partir de muestras contaminadas por flora comensal requiere de una etapa de enriquecimiento previo, que actualmente es de muy bajo rendimiento. El tratamiento varía según la forma de presentación pero, en general, debe ser prolongado y asociado

Uso de bacitracina, L-piroglutamil amilaridasa y aglutinación en el diagnóstico de streptococcus B-hemolítico / Bacitracin, L-piroglutamyl amilaridase use and agglutination in B-hemolytic streptococcus identification

La utilización de la hidrólisis de pirrolidonyl B naftalamida (PYR) para la identificación presuntiva de Streptococcus B hemolitico grupo A, fue comparada con la prueba de susceptibilidad a discos de bacitracina 0.04 U, usando el método de aglutinación como estándar. El 99,3 por ciento de los Streptococcus grupo A fue correctamente identificado con PYR y el 100 por ciento con la prueba de bacitracina; esta última dio falsos positivos en 83,9 por ciento de las cepas grupo G, 85,7 por ciento en el grupo C y 20 por ciento en el grupo B. Ambos métodos mostraron una alta sensibilidad para la identificación de Streptococcus grupo A y destaca la especificidad de la prueba de PYR (100 por ciento) con respecto a prueba de bacitracina (40,7 por ciento)

Identificación de especies de enterococcus en muestras clínicas y susceptibilidad a agentes antimicrobianos / Identification of enterococcus species from clinical samples and susceptibility to antimicrobial agents

The genus enterococcus has 12 species of which, E faecalis and E faecium are most important in human infections. A progressive resistance to penicillin and ampicillin has been detected in these species. The aim of this work was to identify Enterococcus species isolated in a hospital and to study their antimicrobial susceptibility. We studied 209 Enterococcus species coming from patients admitted to a public hospital. Their susceptibility to penicillin, ampicillin, imipenem, vancomycin, tetracycline, chloramphenicol, ciprofloxacin, gentamycin and streptomycin was determined with the agar dilution technique. Eighty seven percent of species were E faecalis and 7,1 percent were E fecium, other isolated species were E hirae, E casseliflaws, E avium, E solitarius and E faecalis variant. 38 percent of these species were isolated from the urinary tract, 22 percent from the skin and 14 percent from surgical wounds. All E faecalis species were susceptible to penicillin, ampicillin, imipenem and vancomycin; 27,3 percent were susceptible to tetracycline, 54,7 percent to chloramphenicol and 80 percent to ciprofloxacin. Seventy three percent of E faecium species were susceptible to penicillin, 80 percent to ampicillin and 60 percent to imipenem. 62 percent of E faecalis and 42.4 percent of E faecium were resistant to streptomycin. It is concluded that the correct identification of Enterococcus species has therapeutic implications

Infecciones bacterianas neonatales / Neonatal bacterial infections

El objetivo de este estudio fue determinar la incidencia, localización, etiología y letalidad de las infecciones bacterianas neonatales graves. Se realizó un análisis prospectivo de los pacientes con infecciones confirmadas, atendidos en la Unidad de Neonatología del Hospital San Juan de Dios, provenientes de la maternidad del mismo hospital, durante 3 años. La incidencia fue 5,4/1 000 nacidos vivos, siendo significativamente mayor en menores de 1 500g 144/1 000. Fueron pretérmino el 73 por ciento y pequeños para la edad gestacional el 30 por ciento. Las infecciones connatales correspondieron a 31 por ciento y las intrahospitalarias a 69 por ciento del total. La forma clínica más frecuente fue la de septicemia. Los agentes causales más frecuentemente identificados fueron, entre las infecciones connatales, streptococcus beta hemolítico del grupo B y, en las intrahospitalarias, staphylococcus aureus. La letalidad alcanzó 31 por ciento y se realizó estudio anatomopatológico en 95 por ciento de los fallecidos. La incidencia y la letalidad disminuyeron en comparación al estudio de 1984